样品的前处理是农药残留量检测过程中重要的步骤之一,它对保证测定结果的准确性和可靠性,减少对色谱柱和检测仪器的污染,提高检测效率都具有重要的影响。
食品中农药的残留量一般在10-6~10-9(W/W)或更低的水平,除了要求检测方法具有相当高的灵敏度和选择性外,也对样品的前处理技术提出了更高的要求。不同的前处理技术有其各自的优缺点和适用范围,在实际工作中,应根据待测样品种类和基质、测定结果要求和检测仪器的不同,并结合实际条件选用合适的样品前处理方法。
常用农残检测前处理步骤:
【试剂配制】
① 缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒出,溶于500ml 蒸馏水中,溶解、混匀即可。
② 底物:往标注为底物的瓶中加入10.3ml蒸馏水。2~4oC环境下冷藏保存。
③ 显色剂:往标注为显示剂的瓶中加入26ml的缓冲液,轻摇使完全溶解。
④ 酶试剂:酶试剂已配成溶液可直接使用。平常要在2~4oC环境条件下冷藏保存。
以上试剂不使用时,需放在2~4oC环境条件下冷藏保存;使用时,从冰箱取出,放置室温后进行检测。
【操作方法】
1)空白对照测试:
取一比色瓶,用相应的移液器吸取对应的试剂,并按以下顺序依次向比色瓶加入:加酶100ul-加2.5ml缓冲液-加显色剂100ul-加底物100ul
将比色瓶摇晃5次左右,倒入比色皿。
2)样品测试:
称取2.0g样品(大小1cm见方即可)放入样品杯中,加入10mL缓冲液后,振荡提取2分钟;过滤,滤液即为样品提取液。
取另一比色瓶,用相应的移液器吸取对应的试剂,并按以下顺序依次向比色瓶加入:加酶100ul-加2.5ml提取液-加显色剂100ul-摇匀静止10分钟-加底物100ul
将比色瓶摇晃5次左右,倒入比色皿。将比色皿放入指定的通道
未来农药残留量检测的样品前处理技术的发展方向应该是尽可能的快速、精确、环保和高度自动化,以尽可能的避免样品转移的损失,减少各种人为因素的偶然误差。