农药残留主要检测方法有两种：
1.色谱检测法：
色谱检测法用作农残定量分析，可为农药残留执法提供依据。色谱法（包括气相色谱、液相色谱、气质联用等）。
优点：灵敏度高、准确、定性定量；
缺点：成本高、操作复杂、时间较长。
2.速测仪法：
速测仪法只能作为农残定性分析，易于在基层推广等特点，是目前我国控制高毒农药残留的一种有效方法，也是目前国内和我省应用最广泛的农药残留快速检测方法。
速测仪法的主要优点：
1、该方法具有快速方便、前处理简便、成本较低等优点，适用于现场定性测定，特别适合在蔬菜生产基地、批发市场及农产品检测部门开展快速检测工作。
2、该方法可对有农药残留的蔬菜进行粗筛，将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外，避免因农药残留发生中毒事件。
速测仪法的主要缺点：
1、酶试剂易失活，导致反应不稳定，检测结果误差较大，重复性不好，实际应用中的确认率大约为60%~70%左右；
2、存在检测盲区，只能检测有机磷和氨基甲酸酯两类农药，不能检测有机氯类、菊酯和其它类别的剧毒农药；
3、不适合检测葱蒜类、香菜、韭菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等14种容易出现假阳性的农产品。
速测仪的检测方法有两种：
1、速测卡法（纸片法）
试剂
固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（速测卡），pH7.5缓冲液溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾用500mL蒸馏水溶解。
仪器
常量天平 有条件配备37℃±2℃恒温装置。
分析步骤
整体测定法
表面测定法（粗筛法）
结果判定：
1、结果以酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制（为阳性）、未抑制（为阴性）表示。
2、与空白对照卡比较，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。
3、对阳性结果的样品，可用其他分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
速测卡法（纸片法）注意事项
1、有些蔬菜如生姜、葱、蒜、辣椒和番茄等汁液中含有破坏酶活性或者使蓝色产物褪色的物质，处理这类蔬菜时，不要让其汁液太多释放出来，不要剪得太碎，浸提时间不易过长，必要时可采用整枝蔬菜浸提或采用表面测定法进行测定。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可以采取整株（体）蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。
2、试纸上的提取液不可太多而溢出试纸，亦不可太少而使反应不完全。
3、最好将每一批样品处理好后一起加样，一面时间过长蒸干。
4、当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，药片加液后放置反应的时间相对延长，延长时间的确定，应以空白对照卡用（体温）手指捏3分钟时可以变蓝，即可往下操作。注意样品放置的时间应与空白对照卡放置的时间一致才有可比性。
5、空白对照卡不变色的原因：一是药片表面缓冲溶液加的少，预反应后的药片表面不够湿润，二是温度太低。
6、如有条件，将农药速测卡放在10℃以下保存效果会更好，每小包产品开封后最好在三天内用完，如用不完，可放入将有变色硅胶吸潮剂的瓶中密封保存，如发现农药测速卡的红色药片由鲜红橙色变为暗淡的褐红色，说明纸片已吸潮失效。
2、酶抑制率法（分光光度法）
根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，导致昆虫中毒致死的原理而设计。如果蔬菜中不含有机磷和氨基甲酸酯类农药，乙酰胆碱酶水解后，水解产物可与显色剂反应产生颜色。如果蔬菜中含有可以抑制乙酰胆碱的活性的有机磷和氨基甲酸酯类农药，这种酶就不能被水解，从而无显色反应。在溶液中加入乙酰胆碱酶和显色剂，用此判断有机磷和氨基甲酸酯类农药残留是否存在。
试剂
1.pH8.0缓冲溶液：分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，用1000mL蒸馏水溶解。
2.显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和15.6mg碳酸氢钠，用20m了缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存。
3.底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。
乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，3min的吸光度变化ΔAo值应控制在0.3以上。摇匀后置4℃冰箱中保存备用，保存期不超过四天。
可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的ΔAo值应控制在0.3以上。
仪器
1.分光光度计或相应测定仪及常量天平。
2.分析步骤
样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，放入烧杯或提取液瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1-2min，倒出提取液，静置3~5min，待用。
对照溶液测试：先于试管中加入2。5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录反应3min的吸光度变化值ΔAo。
样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值ΔAt。
结果的表述计算
1、检测结果按公式计算：
2、抑制率（%）=[（ΔAo-ΔAt）/ΔAo]×100
3、式中：ΔAo…对照溶液反应3min吸光度的变化值：
4、ΔAt…样品溶液反应3min吸光度的变化值：
结果判定
1、结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阴性结果的样品需要重复检验2次以上。对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。
河南冠宇仪器有限公司生产的新一代智能型农药残留检测仪；是根据农业标准方法（NY/T 448-2001）和国家标准（GB/T5009.199-2003）中的酶抑制率法，严格遵循《GB/T5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准》中的规定对蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测。广泛应用于各级政府蔬菜检测中心、农贸市场、超市、环保机构、蔬菜种植基地、饭店、车载及实验室等食品安全检测与监控场所等单位对果蔬中农药残留的检测。能准确、快速检测出蔬菜、水果、粮食、茶叶以及土壤中有机磷和氨基甲酸脂类农药残留的快速检测。
酶抑制率法注意事项
1、葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株（体）蔬菜浸提方法，减少色素的干扰。
2、当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化ΔAo值在0.3以上，即可往下操作。注意样品放置时间应与空白对照溶液放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照溶液3min的吸光度变化ΔAo值<0.3的原因：一是酶的活性不够，二是温度太低。
3、当吸光度大到无法读取时，说明测定液浑浊有干扰。
4、待测样品放入分光光度计速度的影响。待测样品加入底物后，应马上摇匀，放入测定仪，否则影响数据的准确性。
5、比色杯的透光度影响。保持比色杯的清洁，使比色杯有好的透光度是减少检测误差的必要性。比色杯可定期用乙醇进行清洗。
6、微量移液器的影响。微量移液器要专用，贴上标签，避免交差使用造成实际污染：坚持只吸不进的原则，防止试剂污染。
7、药品配制过程中的影响。磷酸盐缓冲液的配制一定要用蒸馏水、纯净水或者离子水，不可使用矿物质水，否则在测量过程中干扰较大，影响准确性。
微信扫一扫